Spezifische Schritte der Zellkultur

1. Gemeinsame Ausrüstung

1. Ausrüstung im Vorbereitungsraum

Destilliergerät für einfach destilliertes Wasser, Destilliergerät für doppelt destilliertes Wasser, Säuretank, Ofen, Schnellkochtopf, Lagerschrank (Lagerung nicht sterilisierter Artikel), Lagerschrank (Lagerung sterilisierter Artikel), Verpackungstisch.Ausrüstung im Lösungsvorbereitungsraum: Torsionswaage und elektronische Waage (Wiegen von Medikamenten), PH-Meter (Messung des PH-Werts der Kulturlösung), Magnetrührer (Konfiguration des Lösungsraums zum Rühren der Lösung).

2. Ausstattung des Kulturraumes

Flüssigstickstofftank, Lagerschrank (zur Aufbewahrung von Kleinigkeiten), Leuchtstofflampe und UV-Lampe, Luftreinigungssystem, Kühlschrank mit niedriger Temperatur (- 80 °C), Klimaanlage, Kohlendioxidflasche, Beistelltisch (zum Schreiben von Testprotokollen).

3. Ausrüstung, die im sterilen Raum untergebracht werden muss

Zentrifuge (Sammeln von Zellen), ultrareiner Arbeitstisch, inverses Mikroskop, CO2-Inkubator (Inkubationskultur), Wasserbad, Drei-Sauerstoff-Desinfektions- und Sterilisationsgerät, 4-°C-Kühlschrank (Platzierung von Serum und Kulturlösung).

2、 Aseptischer Betrieb

(1) Sterilisation des sterilen Raums

1. Reinigen Sie den sterilen Raum regelmäßig: Wischen Sie einmal pro Woche zuerst den Boden mit Leitungswasser, wischen Sie den Tisch ab und reinigen Sie den Arbeitstisch. Anschließend wischen Sie ihn mit 3 ‰ Lysol oder Bromgeramin oder 0,5 % Peressigsäure ab.

2. Sterilisation des CO2-Inkubators (Inkubator): Zuerst mit 3 ‰ Bromgeramin abwischen, dann mit 75 % Alkohol oder 0,5 % Peressigsäure abwischen und dann mit einer UV-Lampe bestrahlen.

3. Sterilisation vor dem Experiment: Schalten Sie die UV-Lampe, den Drei-Sauerstoff-Sterilisator und das Luftreinigungssystem jeweils für 20–30 Minuten ein.

4. Sterilisation nach dem Experiment: Wischen Sie den ultrareinen Tisch, den Beistelltisch und den inversen Mikroskoptisch mit 75 %igem Alkohol (3 ‰ Bromgeramin) ab.

Sterilisationsvorbereitung des Laborpersonals

1. Hände mit Seife waschen.

2. Tragen Sie Isolationskleidung, Isolationskappen, Masken und Hausschuhe.

3. Wischen Sie die Hände mit einem Wattebausch mit 75 %igem Alkohol ab.

Demonstration des sterilen Betriebs

1. Alle Flaschen mit Alkohol, PBS, Kulturmedium und Trypsin, die in die ultrareine Werkbank gebracht werden, sollten mit 75 %igem Alkohol auf der Außenfläche der Flasche abgewischt werden.

2. In der Nähe der Flamme einer Alkohollampe betreiben.

3. Utensilien müssen vor Gebrauch sterilisiert werden.

4. Die weiterhin verwendeten Utensilien (z. B. Flaschenverschlüsse und Tropfer) sollten an einem hohen Ort platziert werden und während des Gebrauchs dennoch überhitzt werden.

5. Alle Vorgänge sollten in der Nähe der Alkohollampe erfolgen, die Aktion sollte leicht und präzise sein und darf nicht zufällig berührt werden.Wenn der Strohhalm den Abfallflüssigkeitstank nicht berühren kann.

6. Achten Sie beim Absaugen von mehr als zwei Arten von Flüssigkeiten darauf, das Saugrohr auszutauschen, um eine Kreuzkontamination zu vermeiden.

Informationen zur Desinfektion von Instrumenten finden Sie im nächsten Kapitel.