Mehrere Enzyme, die üblicherweise in PCR-Experimenten verwendet werden

Polymerase-Kettenreaktion, abgekürzt alsPCRauf Englisch ist eine molekularbiologische Technik zur Amplifikation spezifischer DNA-Fragmente.Man kann es als eine spezielle DNA-Replikation außerhalb des Körpers betrachten, die eine sehr kleine DNA-Menge stark vermehren kann.Während des gesamtenPCRBei jedem Reaktionsprozess spielt eine Substanzklasse eine entscheidende Rolle: Enzyme.

1. Taq-DNA

In Experimenten in der Anfangszeit vonPCRWissenschaftler nutzten die DNA-Polymerase I aus Escherichia coli. Bei diesem Enzym gibt es jedoch ein Problem: Es muss jedes Mal, wenn ein Zyklus durchgeführt wird, neues Enzym auffüllen, was die Arbeitsschritte etwas kompliziert macht und eine vollautomatische Amplifikation schwierig macht.Dieses Problem wurde gelöst, nachdem Wissenschaftler 1988 versehentlich die Taq-DNA-Polymerase aus Thermus aquaticus isoliert hatten. Seitdem ist die automatische Amplifikation von DNA Realität geworden.Die Entdeckung dieses Enzyms macht auchPCRTechnologie eine komfortable, praktische und universelle Technologie.Derzeit ist die Taq-DNA-Polymerase die häufigste Polymerase in DNA-Kits.

2. PfuDNA

Wie oben erwähnt, weist die Taq-DNase einen großen Fehler auf. Daher haben Wissenschaftler die Taq-DNA-Polymerase in gewissem Maße modifiziert, um eine unspezifische Amplifikation aufgrund von Fehlpaarungen zu vermeiden, die zu ungenauen Testergebnissen führen würde.Aber die Modifikation der Taq-DNA-Polymerase kann die Aktivität der DNA-Polymerase bei Raumtemperatur hemmen.Die PfuDNA-Polymerase kann die oben genannten Nachteile der Taq-DNA-Polymerase gut ausgleichen, sodass die PCR-Reaktion normal durchgeführt werden kann und die Erfolgsrate der Zielgenamplifikation effektiv verbessert werden kann.

3. Reverse Transkriptase

Reverse Transkriptase wurde 1970 entdeckt. Dieses Enzym verwendet RNA als Matrize, dNTP als Substrat, folgt dem Prinzip der Basenpaarung und synthetisiert einen DNA-Einzelstrang, der in 5′-3′-Richtung zur RNA-Matrize komplementär ist.Reverse Transkriptase ist in erster Linie von der DNA-Polymeraseaktivität von DNA- oder RNA-Matrizen abhängig und weist daher keine 3′-5′-Exonukleaseaktivität auf.Allerdings weist es eine RNase-H-Aktivität auf, die die Syntheselänge der Reversen Transkriptase bis zu einem gewissen Grad begrenzt.Aufgrund der geringen Wiedergabetreue und Thermostabilität der wilden Reverse-Transkriptase haben Wissenschaftler sie auch modifiziert.

FürPCRExperimente, die wichtigsten Verbrauchsmaterialien sind: einzelne PCR-Röhrchen, 4/8-Streifen-PCR-Röhrchen, PCR-Platten.

LabiosPCR-Verbrauchsmaterialienhabe folgendesVorteile:

PCR-Platten: Breite Kompatibilität mit Thermocyclern;Hoher Kontrast, einfache und gute Identifizierung;gute Fluoreszenzreflexion; gutWärmeübertragung;Zertifizierte DNase-, RNase-, DNA-, PCR-Inhibitoren und pyrogenfrei getestet.

Einzelne PCR-Röhrchen: Verdunstungsbeständig; gutWärmeübertragung;ausgezeichnete optische Klarheit; zertifizierte DNase, RNase, DNA, PCR-Inhibitoren und getestet auf Pyrogenfreiheit.

4/8-Streifen PCR-Röhrchen: Ultradünne Wände; hohe Klarheit; gute Fluoreszenzreflexion;kann in der pharmazeutischen Industrie, der Lebensmittelindustrie und der Molekularbiologie verwendet werden; hochwertiges, reines PP-Material; zertifizierte DNase, RNase, DNA, PCR-Inhibitoren und getestet auf Pyrogenfreiheit.